甘肅省臨床檢驗質量管理年會【百日咳再現及危害】

      會上(shàng)，甘肅省領軍人(rén)才、慶陽市人(rén)民醫院主任檢驗師侯娟娟主任爲(wéi / wèi)我們分享了(le／liǎo)【百日咳: 被忽略下的(de)悄然複現】主題。

百日咳是(shì)由百日咳鮑特杆菌引起的(de)急性呼吸道(dào)傳染病，主要(yào / yāo)通過飛沫傳播，傳染性強。最新的(de)臨床症狀爲(wéi / wèi)慢性咳嗽，如未得到(dào)及時(shí)有效治療，病程可達數個(gè)月。且有較嚴重的(de)并發症，如肺炎、百日咳腦病、心血管系統障礙、營養不(bù)良等。“百日咳再現”在(zài)我國(guó)已經出(chū)現，在(zài)百日咳疫情高發的(de)同時(shí)其流行病學特征發生改變，高危人(rén)群和(hé / huò)傳播模式已經與傳統百日咳相差甚遠。

百日咳再現及危害

      根據國(guó)家衛生計生委疾病預防控制局公布的(de)疫情報告顯示，2014-2018年，我國(guó)百日咳發病率逐年升高，在(zài)新生兒廣泛常規接種百白破疫苗的(de)情況下，發病率依然從2014年的(de)0.5/105暴漲到(dào)2018年的(de)1.6/105。此外我國(guó)百日咳還呈現年長兒和(hé / huò)成人(rén)的(de)發病率上(shàng)升，成爲(wéi / wèi)主要(yào / yāo)傳染源、出(chū)現局部地(dì / de)區爆發、出(chū)現新臨床特征等情況，2005-2014年天津診斷百日咳病例882例，其中成年人(rén)252例，占發病人(rén)數的(de)28.57%。2005-2008年無成年人(rén)病例的(de)報告；2009年爲(wéi / wèi)5.26%；随後逐年增加，到(dào)2013年發病率達到(dào)最高的(de)44.09%。後五年成年人(rén)發病構成比前五年上(shàng)升了(le／liǎo)26倍。發病人(rén)群年齡分布中，21-30年齡段占比最高，爲(wéi / wèi)36.12%。

*中國(guó)2011_2017年百日咳流行病學特征分析. 中國(guó)疫苗和(hé / huò)免疫. 2018

      我國(guó)正面臨着“百日咳再現”問題的(de)嚴峻考驗，近年來(lái)國(guó)内一(yī / yì ／yí)些省份也(yě)陸續出(chū)現百日咳疫情大(dà)幅上(shàng)升，引起各方高度關注，百日咳現已經成爲(wéi / wèi)臨床醫師廣泛關注的(de)傳染性疾病。百日咳鮑特杆菌引起的(de)早期呼吸道(dào)感染症狀在(zài)臨床表現方面與其他(tā)呼吸道(dào)病原體引起的(de)呼吸道(dào)疾病較爲(wéi / wèi)類似，因此需要(yào / yāo)有效的(de)診斷方法能快速地(dì / de)鑒定百日咳鮑特杆菌，有助于(yú)流行病學現場處置。

      目前臨床上(shàng)常用細菌培養和(hé / huò)血清學篩查等方法對百日咳杆菌進行檢測，但百日咳杆菌分離培養難度大(dà)，培養周期長，而(ér)血清學篩查存在(zài)靈敏性低，特異性不(bù)高的(de)缺陷，限制了(le／liǎo)上(shàng)述兩種百日咳杆菌檢測方法在(zài)臨床上(shàng)的(de)應用。

本項目通過核酸檢測的(de)方法快速地(dì / de)鑒定樣本中的(de)百日咳鮑特杆菌，是(shì)《中國(guó)兒童百日咳診斷及治療建議》中推薦的(de)百日咳杆菌的(de)有效診斷方法，有助于(yú)實現精準診斷，爲(wéi / wèi)後續的(de)藥物治療提供診斷依據指導精準用藥，并且有利于(yú)流行病學的(de)處置。

《中國(guó)兒童百日咳診斷及治療建議》中指出(chū)的(de)百日咳的(de)臨床診斷标準和(hé / huò)實驗室診斷标準：

IS481引物

無法特異性檢測百日咳

億立方應用生物信息學方法

設計出(chū)特異針對百日咳的(de)引物

      ①應用生物信息學方法服務器計算，對比NCBI數據庫中所有2萬多條百日咳序列設計引物探針，100%匹配能檢出(chū)。傳統引物設計選擇有限的(de)代表序列，包容性和(hé / huò)特異性不(bù)足。

      ②所選擇的(de)檢測靶标爲(wéi / wèi)高拷貝數靶标（其在(zài)百日咳基因組中的(de)拷貝數爲(wéi / wèi)15-18個(gè)），提高了(le／liǎo)檢測的(de)靈敏度，最低檢測限達到(dào)200 copies/mL。

百日咳核酸檢測的(de)必要(yào / yāo)性

      百日咳是(shì)一(yī / yì ／yí)種可以(yǐ)治愈的(de)疾病,患者的(de)預後通常較好。然而(ér),準确的(de)病情診斷是(shì)控制百日咳傳播的(de)關鍵,特别是(shì)疾病早期的(de)判斷。百日咳的(de)實驗室檢測易受标本采集、采樣時(shí)間、疫苗接種史和(hé / huò)抗生素使用等因素的(de)影響,百日咳杆菌難以(yǐ)培養且培養周期較長,血清學檢測的(de)靈敏度和(hé / huò)特異性也(yě)不(bù)高。相比之(zhī)下,聚合酶鏈式反應(PCR)技術作爲(wéi / wèi)診斷百日咳感染的(de)敏感方法,可以(yǐ)實現疾病的(de)及早發現、診斷和(hé / huò)治療,顯著提高患者的(de)生活質量。

      深圳肌膚口令生物科技有限公司的(de)百日咳杆菌核酸檢測試劑盒具有更高的(de)靈敏性，理論上(shàng)能檢測出(chū)一(yī / yì ／yí)個(gè)拷貝的(de)病原體，更适合于(yú)早期病程患兒病情診斷；針對百日咳特異性序列設計引物探針，與血清學檢驗所用的(de)抗原片段相比，具有更高的(de)特異性，能提高檢測的(de)特異性；可擴大(dà)檢測人(rén)群範圍，對免疫缺陷者的(de)檢測成爲(wéi / wèi)可能。血清學篩查存在(zài)靈敏性低，特異性不(bù)高的(de)缺陷，百日咳杆菌核酸檢測更适用于(yú)臨床大(dà)規模篩查。

      該産品适用于(yú)檢測人(rén)口咽拭子(zǐ)或鼻咽拭子(zǐ)樣本中的(de)百日咳杆菌DNA，是(shì)全國(guó)首個(gè)獲批第三類醫療器械注冊證的(de)産品，目前已廣泛應用于(yú)全國(guó)各大(dà)醫院。

      采用臨床廣爲(wéi / wèi)接受并且穩定實時(shí)熒光PCR技術，以(yǐ)百日咳杆菌基因組DNA高度保守區爲(wéi / wèi)靶區域進行基因檢測，反應體系靈活多變，檢測不(bù)受樣本數量的(de)限制，可同時(shí)完成多個(gè)樣本檢測，操作簡單，檢測試劑中包含核酸提取試劑，核酸提取後進行PCR反應，PCR反應體系中含有dU-UNG酶防污染體系和(hé / huò)陰陽質控品，以(yǐ)避免假陽性和(hé / huò)假陰性結果。

百日咳多中心

      我國(guó)人(rén)口基數大(dà)，百日咳實際發病數遠高于(yú)報告數，且公共衛生意識不(bù)足，成人(rén)感染不(bù)重視且沒有成人(rén)疫苗，爲(wéi / wèi)進一(yī / yì ／yí)步完善、規範、和(hé / huò)解決百日咳患者臨床實驗室診斷中的(de)難點問題，提高醫療保健機構百日咳診療能力，保障人(rén)民生命健康，根據中國(guó)婦幼保健院協會《關于(yú)發布“百日咳杆菌核酸檢測在(zài)婦兒領域應用的(de)多中心研究”項目研究方案的(de)通知》（中婦幼便函[2021]281号）文件要(yào / yāo)求。

      億立方将不(bù)斷憑借自身的(de)優勢，繼續做敢于(yú)開拓創新、有責任擔當的(de)高新技術企業，爲(wéi / wèi)落實健康中國(guó)建設添磚加瓦。

      億立方人(rén)定會不(bù)負期待，繼續以(yǐ)自我創新爲(wéi / wèi)核心推動力，努力進取，力争做分子(zǐ)診斷先進技術的(de)領軍企業。