
聚合酶鏈式反應(PCR)是(shì)一(yī / yì /yí)種用于(yú)放大(dà)擴增特定的(de)DNA片段的(de)分子(zǐ)生物學技術,通過對基因的(de)選擇性片段進行體外高效擴增,從而(ér)實現目的(de)基因的(de)檢測。
PCR-熒光探針法的(de)主要(yào / yāo)原理是(shì):PCR擴增時(shí)在(zài)加入一(yī / yì /yí)對引物的(de)同時(shí)加入一(yī / yì /yí)個(gè)特異性的(de)熒光探針,該探針爲(wéi / wèi)一(yī / yì /yí)寡核苷酸,兩端分别标記一(yī / yì /yí)個(gè)報告熒光基團和(hé / huò)一(yī / yì /yí)個(gè)淬滅熒光基團。探針完整時(shí),報告基團發射的(de)熒光信号被淬滅基團吸收;随着PCR擴增,Taq酶的(de)5'端-3'端外切酶活性将探針酶切降解,使報告熒光基團和(hé / huò)淬滅熒光基團分離,從而(ér)熒光監測系統可接收到(dào)熒光信号,即每擴增一(yī / yì /yí)條DNA鏈,就(jiù)有一(yī / yì /yí)個(gè)熒光分子(zǐ)形成,實現了(le/liǎo)熒光信号的(de)累積與PCR産物形成完全同步。