
PCR-反向點雜交法常用于(yú)基因分型、基因突變檢測。主要(yào / yāo)原理是(shì)将待用的(de)探針分别點到(dào)硝酸纖維素膜或尼龍膜上(shàng),每個(gè)探針一(yī / yì /yí)個(gè)點并編上(shàng)号,再将待測的(de)DNA樣本(一(yī / yì /yí)般是(shì)經PCR特意性擴增的(de)産物,在(zài)PCR引物5’端預先進行生物素标記,使擴增産物相應标記有生物素)與之(zhī)雜交,這(zhè)樣待檢樣本就(jiù)會與具有同源序列的(de)探針結合,經洗滌去除未結合的(de)DNA樣本,由于(yú)待測的(de)DNA樣本具有生物素類的(de)标記物,結合了(le/liǎo)待測DNA的(de)探針點上(shàng)就(jiù)帶有生物素類的(de)标記物,再經相應的(de)顯色反應就(jiù)能顯出(chū)雜交信号。